简要描述：骏德仪器实验型血液冷冻干燥机是针血液制品专业设计的一款冻干机，骏德仪器凭借自己独特的设计优势：安卓系统加箱式外观，在血小板冻干再水化的条件及其凝血功能变化研究方向得到了广泛的应用和推广。原位预冻功能有效避免了 样品在转移过程中受到交叉污染。板层温度可控，可以设置梯度升温，进一步优化冻干方案，为客户冻干工艺的建设提供可行性数据。
骏德仪器实验型FD-503血液冷冻干燥机（济南骏德仪器有限公司）、恒温振荡水浴、流式细胞仪等
1.3 实验方法
1.3.1 血小板的冻干保存 血小板浓缩液离心洗涤后重悬于海藻糖加载缓冲液中， 将上述悬浮液转移进入离心管中，并用聚四氟乙稀生料带密封，于37℃水浴中振荡孵化 4h。 将孵化后的血小板悬浮液 800g 离心 3min。 去除上层孵化液，得到沉淀的血小板块，加入冻干保护液打散重悬，使用血球**进行计数， 调节血小板在冻干保护液中的浓度为 1×109个/ml。 将制备好的血小板冻干悬浮液装入特制冻干血盒中，密封充注口。 将血小板冻干悬液先以 20℃/min 的速率冻结至-40℃， 预冻 2h后，再以 1.5℃/min 对搁板升温至-30℃，退火 0.5h，然后进入一次干燥，-38℃维持一次干燥条件 20h，zui后以 0.2℃/min 的加热速率使隔板温度升高至20℃，维持二次干燥条件 10h 直至冻干结束。 冻干的血小板密封保存在室温。
1.3.2 冻干血小板的水化 将 PBS 缓冲液和蒸馏水以 3:1 的比例混合制成血小板冻干复水液，将1ml 复水液在室温下直接加入冻干样品瓶中，轻轻震荡直到样品完全溶解于复水溶液中。
1.3.3 检测血小板回收率 用血球**分别对冻干前和冻干再水化后的血小板计数， 计算冻干再水化血小板回收率。冻干再水化血小板回收率(%)=冻干再水化后血小板计数/冻干前血小板计数×100%。
1.3.4 检测血小板稳定性 冻干再水化血小板分别在室温放置 0h、2h、4h、6h、8h 后，用血球**测定血小板回收率。
1.3.5 血小板形态及超微结构观察 用扫描电镜观察血小板的形态；分别以戊二醛固定、脱水、环氧树脂包埋后制作超薄切片， 用透射电镜观察血小板超微结构变化。
1.3.6 血小板聚集反应检测 将冻干血小板复水后转入离心管中进行洗涤以去除细胞外保护剂，再用新鲜冰冻血浆重悬血小板， 调整血小板浓度为(0.2~0.3)×1012/L。 用 APACT-2 型血小板**冻干再水化后血小板对四种同浓度诱导剂—凝血酶、胶原、ADP 和瑞斯托霉素的聚集反应。
1.3.7 血小板表面糖蛋白检测 用三色流式细胞仪分别检测冻干再水化血小板表面激活指标 CD62p和 PAC-1 的表达，经凝血酶激活后测定 CD62p 和PAC-1 的再表达。 再表达率=凝血酶处理后表达率-血小板表达率1.3.8 统计分析 数据以均数±标准差(x±s)表示，采用 SPSS16.0 统计软件进行数据分析处理， 组间差异比较用 t 检验，P<0.05 为差异有统计学意义。
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