紫外可见分光光度计是基于物质对紫外光(波长范围10 - 400nm)和可见光(波长范围400 - 760nm)的吸收特性建立起来的一种分析仪器,在多个领域广泛应用。
工作原理
其依据朗伯 - 比尔定律,即当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度b成正比,公式为A=εbc ,其中ε为摩尔吸光系数。通过测量吸光度,可对物质进行定量分析。
紫外可见分光光度计基本结构
1.光源:提供紫外光和可见光,常用钨灯(可见光区)、氢灯或氘灯(紫外光区)。
2.单色器:将复合光分解成单色光,并能从中选出所需波长单色光的光学装置,主要由入射狭缝、准直镜、色散元件、聚焦元件和出射狭缝等组成,色散元件常用棱镜或光栅。
3.样品池:用于盛放样品溶液,有玻璃和石英两种材质,玻璃池适用于可见光区,石英池适用于紫外光区和可见光区。
4.检测器:将透过样品的光信号转换为电信号,常用光电管、光电倍增管等。
5.信号处理与显示系统:对检测器输出的电信号进行处理和显示,以吸光度、透光率等形式呈现测量结果。
主要类型
1.单光束分光光度计:结构简单、价格便宜,但测量时需手动切换参比溶液和样品溶液,测量误差相对较大。
2.双光束分光光度计:能自动比较透过参比溶液和样品溶液的光强度,减少了光源强度变化等因素的影响,测量精度较高。
3.双波长分光光度计:采用两个不同的波长交替照射同一样品溶液,可消除背景干扰和样品混浊的影响,适用于复杂样品的分析。
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