CCK-8

CCK-8
CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度的比色检测试剂盒。检测原理为：WST-8在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜（formazan，参考图1)，生成的甲臜的颜色深浅与细胞增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。
本试剂盒可用于细胞增殖测定，细胞毒性的检测，药物筛选，以及细胞生长抑制检测等。
CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8）使用方法
1.以96孔板为例，96孔板中每孔接种100μL的细胞悬液，在细胞培养箱预培养24 h。
2.向每孔加入10μL不同浓度的待测物质。如果仅测定细胞活性，则不需要2~3步骤，直接从第4步操作。
3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（依据待测药物而定）。
4.向每孔加入10μL CCK-8溶液（注意不要产生气泡，轻轻混匀）。
5.将培养板在培养箱内孵育适当时间（一般0.5~2 h）。
6.酶标仪测定450 nm处的吸光值。
细胞活力计算
细胞存活率*（%）=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100%
抑制率*（%）=[1-(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100%
As:实验孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液)；
Ac:对照孔吸光度(含细胞、培养基、CCK-8溶液，不含药物)；
Ab:空白孔吸光度(含培养基、CCK-8溶液，不含细胞、药物)。
https://www.chem17.com/st325538/product_24800161.html
http://www.life-ilab.com.cn/SonList-2221115.html